Kakšen je namen primarnega protitelesa v Western blotu?
Kakšen je namen primarnega protitelesa v Western blotu?

Video: Kakšen je namen primarnega protitelesa v Western blotu?

Video: Kakšen je namen primarnega protitelesa v Western blotu?
Video: Сабата не прощает Вестерн 1968 год Кино 2024, Julij
Anonim

Z metodo neposrednega odkrivanja, konjugirano z encimom ali fluoroforjem primarno protitelo se uporablja za odkrivanje zanimivega antigena na blot . Pri posredni metodi odkrivanja neoznačeno primarno protitelo se najprej uporabi za vezavo na antigen.

Poleg tega, kaj je primarno protitelo v Western blotu?

The primarno protitelo prepozna in veže epitop ali specifično aminokislinsko sekvenco proteina, ki nas zanima. Sekundarno protiteles uporablja za western blotting so običajno konjugirani z encimom; najpogosteje uporabljena encima sta peroksidaza hrenovega radiča (HRP) in alkalna fosfataza (AP).

Poleg tega, kaj počne primarno protitelo? Primarna protitelesa so imunoglobulini, ki se vežejo na določen antigen ( beljakovine , peptid, majhna molekula itd.) in so običajno nekonjugirani. Dobro primarno protitelo prepozna in se veže z visoko afiniteto in specifičnostjo za čiščenje, odkrivanje in merjenje antigena.

Kakšen je torej namen Western blota?

A western blot je laboratorijska metoda, ki se uporablja za odkrivanje specifičnih beljakovinskih molekul med mešanico beljakovin. Nato se proteinske molekule ločijo glede na njihovo velikost z uporabo metode, imenovane gel elektroforeza. Po ločitvi se proteini prenesejo iz gela na a blotting membrano.

Kako se protitelesa uporabljajo pri Western blotingu?

Protitelesa so rabljeno za odkrivanje ciljnih beljakovin na western blot (imunoblot). The protiteles so konjugirani s fluorescenčnimi ali radioaktivnimi oznakami ali encimi, ki povzročijo naknadno reakcijo z nanešenim reagentom, kar vodi do obarvanja ali oddajanja svetlobe, kar omogoča zaznavanje.

Priporočena: